工艺表征人ELISA试剂盒操作的应用范围,你知道吗?

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工艺表征人ELISA试剂盒操作的应用范围,你知道吗?

时间:2023-01-13 18:35:17 阅读:87
工艺表征人ELISA试剂盒的主要组成成份是什么呢?根据ELISA试剂盒的应用范围,可将ELISA试剂盒分为拿几种呢?
  完整的ELISA试剂盒主要的组成成份如下:
  (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
  (2)C的抗原或抗体(结合物);
  (3)酶的底物;
  (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
  (5)结合物及标本的稀释液;
  (6)洗涤液,在板式人ELISA试剂盒中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
  (7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的zui终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
  操作过程的控制:
  ⑴ 严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30——60min。
  ⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
  (3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
  (4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
  (5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
  (6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
  (7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
  (8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
  (9)应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。人ELISA试剂盒以上的措施可以使“花板”降至zui低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
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