膜蛋白抗体开发策略:基于过表达细胞系的全人源抗体库筛选技术

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膜蛋白抗体开发策略:基于过表达细胞系的全人源抗体库筛选技术

时间:2022-05-21 20:38:15 阅读:130
  抗体药物是近二十年以来生物医药领域主要方向之一,成功发现新抗体的关键是抗体筛选过程中所采用的靶点蛋白必须能正确反映其天然空间构象。但目前在研靶点中,大部分蛋白为单次或者多次跨膜蛋白,有的具有由多个结构域组成的扩展胞外区域,给抗体筛选带来了巨大挑战。

  解决这个问题的一个可行方案是使用整个细胞作为抗原来进行抗体文库筛选,从而保持蛋白质的天然构象以及避免抗体识别不必要的表位。

  噬菌体展示技术在抗体筛选中的应用

  细胞系表达系统授权在生产单克隆抗体(mAb)的过程中,杂交瘤技术曾是较为常用的技术,但杂交瘤技术存在一些难以克服的缺陷,例如:

  1必须对小鼠周期性免疫,有些蛋白(毒性蛋白、组蛋白)难以获得理想的免疫效果

  2生成的抗体需要进行人源化改造,工作费时费力;

  而噬菌体展示全人源抗体技术则为此提供了一种高效解决方案,该技术优势主要在于:

  1筛选流程简便,周期短,且不依赖于活体的免疫系统

  2能够直接获得全人源抗体,避免了复杂的人源化工作

  该技术最早由George·Smith发明,基本原理是将多肽或蛋白质的基因与丝状噬菌体P3蛋白融合表达,在辅助噬菌体的参与下,展示在噬菌体颗粒表面。将蛋白分子的基因型与表型完美的结合在了一起。这样构建出的抗体库经过2——3轮迭代筛选即可获得大量特异性结合抗原的抗体基因序列。
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